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CAS No.: 3513-03-9
盐酸灭瘟素S(Blasticidin S)是一种核苷类抗生素,别名为灭瘟素S、杀稻瘟菌素S或稻瘟散,首次从灰链霉菌(Streptomyces griseochromogenes)中分离。
规格 | 价格 | 库存 |
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5mg | RMB 650 | 产品咨询 |
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25mg | RMB 1845 | 产品咨询 |
描述
盐酸灭瘟素S(Blasticidin S)是一种核苷类抗生素,别名为灭瘟素S、杀稻瘟菌素S或稻瘟散,首次从灰链霉菌(Streptomyces griseochromogenes)中分离。一般使用其盐酸盐形式。盐酸灭瘟素S常用于筛选携带bsr/BSD/bls基因(常标记为bsrr/bsdr/Blastr)质粒的哺乳动物稳定转染细胞株,作用强效而快速。
盐酸灭瘟素S通过干扰核糖体结合肽段而特异性抑制原核细胞或真核细胞的蛋白质合成。目前已经有3种灭瘟素耐受基因,一是分离自链霉菌(Streptoverticillum sp.)的乙酰基转移酶基因bls;另外两种是脱氨酶基因,分别是从蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)中分离的bsr和从土霉菌(Aspergillus terreus)中分离的BSD基因。bsr和BSD基因是最常用的筛选标志,用于哺乳动物和植物细胞的稳定细胞株筛选。盐酸灭瘟素S也可用于大肠杆菌(E. coli)等原核细胞的筛选。
大肠杆菌通常对50 μg/ml及以上浓度的盐酸灭瘟素S敏感。哺乳动物细胞的敏感浓度范围为1 µg/mL - 50 µg/mL,一般可一周内形成具有Blasticidin S抗性的稳定哺乳动物细胞系。
保存条件
粉末-20℃有效期3年。配制成溶液后于-20℃保存,至少一年有效,液体形式应避免反复冻融。
使用方法
1. 细胞转染含抗性基因的质粒48h后,用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%)。 2. 每3 - 4天用含抗生素的新鲜培养基换液。 3. 7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要增加一周或更久。 4. 转移5 - 10个耐受克隆到35 mm细胞盘中,加入选择培养基维持培养7天。随后可用细胞毒性实验进行检测。
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